SN/T 3962-2014 水仙迟季黄化病毒的检疫鉴定方法

SN/T 3962-2014.Detection and identification of Narcissus late season yellows virus. 1范围 SN/T 3962规定了水仙迟季黄化病毒检测的程序和方法。 SN/T 3962适用于进出境水仙中水仙迟季黄化病毒的检测。 2原理 水仙迟季黄化病毒的血清学和分子生物学特性是制定本检疫鉴定方法的主要依据。水仙迟季黄化病毒的分类地位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、基因组等参见附录A。 3仪器设备、用具及试剂 3.1 仪错设备 高速冷冻离心机、电子天平(1/1 000g)、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、-20℃低温冰箱和-80℃超低温冰箱、凝胶成像分析系统、pH计、微波炉、磁力搅拌器恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台、酶 标仪等。 3.2 用具 各种量程的可调移液器(1000 μL、200 μL、100 μL、20 μL、10 pL、2 μL)、PCR反应管、无RNase离心管(1.5 mL)、研钵、酶联板等。 3.3试剂 酶联板捕获抗原酶联免疫吸附测定法(plate-trapped antigen ELISA,PTA-ELISA)试剂见附录B,巢式RT-PCR试剂见附录C。 4检测与鉴定 4.1 PTA-ELISA 具体方法见附录B 4.2巢式 RT-PCR 具体方法见附录C