SN/T 1405—2004 进出口蜂产品中10-羟基--癸烯酸的检验方法毛细管电泳法

SN/T 1405—2004. 1范围 SN/T 1405规定了进出口蜂产品中10-羟基-α-癸烯酸(10-HDA)检验的抽样、制样和毛细管电泳检验方法。 SN/T 1405适用于进出口蜂王浆及蜂王浆冻干粉中10-羟基-α-癸烯酸(10-HDA)的检验。抽样和制样 2.1检验批 蜂王浆以不超过1 000 kg 为一检验批,蜂王浆冻干粉以不超过250 kg 为一检验批。同一检验批商品应具有相同的特征,如包装,标记、产地、规格、等级等。 2.2抽样数量 抽样数量见表1。 3.2.7缓冲溶液(pH值为9.2):称取2.86 g四硼酸钠(3.2.6),0.718 g SDS(3.2.5),用水溶解,并用水定容至100 mL。此溶液含四硼酸钠0.075 mol/1,SDS 0.025 mol/L 。 3.2.810-HDA标准品:99.0%以上。使用前在放有浓硫酸的干燥器内减压干燥24 h。 3.2.910-HDA 标准溶液:取干燥后的10-HDA标准品约0.025 g(准确至0.000 2 g),加无水乙醇溶解并移入25 mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度﹐摇匀。此溶液每毫升含10-HDA约1 mgo 3.3仪器和设备 3.3.1毛细管电泳仪:带紫外检测器。 3.3.2超声波清洗仪。 3.3.3涡旋混匀器。 3.3.4离心机;4 000 r/min,16 000 r/ min。 3.3.5离心管; 15 mL、1.5 mL具塞离心管。 3.4测定步骤 3.4.1蜂王浆:试样解冻至室温,用玻璃棒充分搅匀。称取0.5 g样品(准确至0.001 g),置于50 mL.容量瓶中,加人2 mL 盐酸溶液(3.2.2)，置涡旋混匀器上混合使试样溶解。加入30 mL无水乙醇(3.2.1),边加边轻轻摇动。再定量加入10.0 mL内标溶液(3.2.4),用无水乙醇定容至刻度﹐摇匀,立即在超声波清洗仪中超声15 min,取出,转入15 mL离心管,在3 000 r/min离心10 min。准确取上清液0.5 mL,转入1.5 mL离心管,加人0.5 mL缓冲溶液(3.2.7),混匀后在16 000 r/min离心10 min进行测定。 3.4.2︰蜂王浆冻干粉:试样解冻至室温,称取0.15 g(准确至0.001 g),置于50 mL容量瓶中,加入20 mL无水乙醇(3.2.1),2 mL盐酸溶液(3.2.2),置涡旋混匀器上混合使试样溶解。再定量加人10.0 mL内标溶液(3.2.4),用无水乙醇定容至刻度,摇匀,立即在超声波清洗仪中超声15 min,取出,转人15 mL离心管,在3 000 r/min离心10 min。准确取上清液0.5 mL,转入1.5 mL离心管,加入0.5 mL缓冲溶液(3.2.7) ,混匀后在16 000 r/min离心10 min进行测定。 3.5校正因子测定 定量移取0.5 mL,1.0 mL,2.0 mL,3.0 mL,4.0 mL和 5.0 mL 10-HDA标准溶液(3.2.9)至10 mL容量瓶中,定量加入2.0 mL内标溶液(3.2.4),用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。分别吸取此溶液0.5 mL,加入0.5 mL缓冲溶液(3.2.7),混匀后进行电泳分析。用峰面积计算,求出平均校正因子