SN/T 3581-2013 美澳型核果褐腐病菌实时荧光PCR检测方法

SN/T 3581-2013.Detection and identification of Monilinia fructicola ( Winter) Honey with real-time fluorescence PCR. 1范围 SN/T 3581规定了美澳型核果褐腐病菌[Monilinia fructicola ( Winter) Honey]的 应用TaqMan MGB探针进行实时荧光PCR的检测方法。 SN/T 3581适用于美澳型核果褐腐病菌的寄主包括核果类水果以及木瓜属、山楂属.枇杷属等传带美澳型核果褐腐病菌的寄主上的该病菌的分子检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注8期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文.件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分 析实验室用水规格和试验方法 SN/T 1193基因 检验实验室技术要求 SN/T1871美澳型核果褐腐病菌检疫鉴定方法 3原理 3.1病菌分类地位及形态特征 按照SN/T 1871。 3.2 鉴定原理 根据美澳型核果褐腐病菌与其近似种包括核果褐腐病菌和欧洲仁果褐腐病菌的内间隔转录区基因的不同,设计特异性的引物和探针,应用相关仪器,包括实时荧光PCR仪等对美澳型核果褐腐病菌进行实时荧光PCR鉴定。 4主要仪器用具和试剂 4.1试剂 CTAB提取液、Tris饱和酚、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇.无水乙醇、RNA酶、液氮、实时荧光PCR反应缓冲液。