SN/T 3960-2014 蓝莓矮化植原体检疫鉴定方法

SN/T 3960-2014.Detection and identification of Blueberry stunt phytoplasma. 1范围 SN/T 3960规定了蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定方法。 SN/T 3960适用于进出境蓝莓树苗木及蓝莓产品中蓝莓矮化植原体的检疫和鉴定。 2蓝莓矮化植原体基本信息 英文名:Blueberry stunt phytoplasma 分类地位:软壁菌门(Tenericutes)，柔膜菌纲(Mollieutes)，非固醇菌原体目(Acholeplasmatales)，非固醇菌原体科(Acholeplasmataceae)，植原体属(Phytoplasma),16Sr I植原体组D亚组。 蓝莓矮化植原体的其他信息参见附录A。 3方法原理 蓝莓矮化植原体生物学特性和基因特性作为本标准鉴定方法的主要依据。 DAPI染色后的形态学观察为初步筛查方法;以植原体核糖体1I6SrDNA通用引物进行PCR扩增、测序及限制性内切酶指纹图谱为主要的判定依据。 4仪器用具和主要 试剂 4.1 仪器 PCR仪、超净工作台、高压灭菌锅、制冰机、台式冷冻离心机、台式小型离心机、超低温冰箱、常规冰箱、涡旋振荡器、微量进样器、电泳仪凝胶成像系统、荧光显微镜、透射电子显微镜、超薄切片机等。 4.2 用具 移液器、研钵、离心管、PCR管、量筒、烧杯、酒精灯、镊子等