SN/T 1376.1-2004 牛传染性胸膜肺炎病原分离鉴定

SN/T 1376.1-2004. 1范围 SN/T 1376.1规定了牛传染性胸膜肺炎病原的分离与鉴定方法。本标准适用于牛传染性胸膜肺炎病原的分离与鉴定。规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准中引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682——1992分析实验室用水规格和试验方法 3设备 3.1灭菌拭子。 3.2恒温培养箱。 3.3普通显微镜。 3.4穿刺针及注射器。 3.5净化工作台。 4培养基 4.1试验用培养基包括运输培养基,10%马血清肉汤培养基,10%马血清肉汤琼脂培养基、普通10%马血清肉汤琼脂培养基、葡萄糖生化培养基、精氨酸生化培养基和四氮唑盐生化培养基。 4.2培养基配制方法见附录A。 4.3实验用水应符合GB/T 6682--1992中的二级水标准。 6.1.2无污染样品:无菌抽取的胸腔液﹑关节滑液可直接接种。 6.2样品的接种 6.2.1取0.1 mL～0. 3 mL样品无菌接种于5管10%马血清肉汤培养基中,置37℃培养直至第10 d.6.2.2用无菌接种环钩取样品划线接种于10%马血清肉汤琼脂培养基上,每个样品共接种5个培养皿。每个培养皿用胶布或者蜡封口,置37℃培养直至第10 d。 6.3生长观察 6.3.1接种后第3d开始每天观察接种管及培养皿细菌生长情况直至第10 d。 6.3.2在10%马血清肉汤试管中,牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为:初期呈轻微混浊或白色点状或丝状,后逐渐均匀混浊,呈半透明稍带乳光,无菌膜或沉淀,也无颗粒悬浮。 6.3.3 在10%马血清肉汤琼脂培养基上,牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为:生长迟缓,为水滴状圆形略带灰色的微小菌落,中央有乳头状突起,呈“煎蛋”样外观,菌落直径约0.2 mm~2.0 mm。 6.4将可疑菌落或可疑肉汤培养物接种于普通10%马血清肉汤琼脂培养基,培养3 d~4 d,连传三代进行纯化,供病原鉴定用。