SN/T 1394—2004 布氏杆菌病全乳环状试验方法

SN/T 1394—2004. 1范围 SN/T 1394规定了布氏杆菌病全乳环状试验的操作技术要求。 SN/T 1394适用于乳牛场布氏杆菌病的监测和诊断泌乳母牛布氏杆菌病的初筛试验,不适用于患乳房炎及其他乳房疾病母牛的乳、初乳、脱脂乳和煮沸过的乳,也不适用于腐败、变酸和冻结过的乳。 试剂和材料 2.1试剂 标准抗原:四氮唑染色抗原(呈红色),或苏木素染色杭原(呈蓝色)，于2℃～8℃暗处保存。 2.2乳样 受检乳应为新鲜的全脂乳。采乳时应将母畜的乳房用温水洗净,再用洁净纱布擦干,将乳挤于洁净的器皿中。如将乳样于2℃一8℃保存7天内均可使用。 2.3 材料 2.3.1微量移液器及吸头. 2.3.2凝集试验管:玻璃v规格为13 mm×100 mm,圆底、洁净。 2.3.3试管架。 2.3.4水浴槽。 2.3.5移液器或刻度吸管。 3操作方法 3.1取乳样1 mL加于灭菌凝集试验管。 3.2将标准抗原充分振荡,混合均匀后,取出50 pL加入乳样中,充分混匀。 3.3置37℃~38℃水浴中60 min。 4结果判定 4.1判定原则 按乳脂和乳柱的颜色进行判定。用四氮唑染色抗原时颜色呈红色,用苏木素染色抗原颜色呈蓝色。脂肪较少或无脂肪的牛乳呈阳性反应时,菌体呈凝集现象下沉管底,判定时以乳柱的反应为准。 4.2判定标准 4.2.1阳性反应(十十+):乳柱上层乳脂形成明显红色或蓝色的环带,乳柱呈白色,临界分明。 4.2.2阳性反应(十十):乳脂层的环带呈红色或蓝色,但不显著,乳柱略带颜色。 4.2.3弱阳性反应(＋):乳脂层的环带颜色较浅,但比乳柱颜色略深。 4.2.4︰疑似反应(士):乳脂层的环带颜色不明显，与乳柱分界不清,乳柱不褪色。 4.2.5阴性反应(一):乳柱上层无变化v乳柱颜色均匀。