SN/T 1419—2004 疖疮病细菌学诊断操作规程

SN/T 1419—2004. 1范围 SN/T 1419规定了疖疮病感染病原-灭鲑气单胞菌的分离鉴定方法。本标准适用于鲑科鱼疖疮病的检验,疫情监测和流行病学调查。 2仪器、试剂 2.1仪器 显微镜(具油镜、暗视野),恒温培养箱、接种环、培养皿等。 2.2培养基和试剂 PBG培养基、2%琼脂、蛋白陈大豆琼脂培养基(TSA培养基),FA培养基、葡萄糖蛋白陈水、革兰氏染色液Ⅰ、、l 、Ⅳ 、V-P试剂(培养基和试剂的配制见附录A)。 3分离鉴定步骤 分离鉴定流程见附录B。 4临床诊断 4.1临床分型 急性型病鱼很快死亡,无任何外部症状。亚急性型病情发展较慢,在躯干肌肉上形成典型的r疮变化后,陆续死亡。慢性型病鱼长期处于带菌状态,无症状,也不死亡。 4.2临床症状和病理变化 发病鱼表现为离群独游,活动缓慢,体色发黑。在鱼体驱干部,通常在背鳍基部两侧的肌肉组织上出现数个小范围的红肿脓疮向外隆起,柔软浮肿。隆起表面逐渐出血坏死,溃烂而形成溃疡口。溃疡范 5采样 健康监测的采样:每个渔场应每六个月检查一次,原则上采集总鱼数的0.2%,最少不应小于150条鱼,从肾﹑脾、肝等脏器无菌采集样本。如果渔场经实验室检测两年,未发现病原，也无任何可疑临床症状之后,则认为是无灭鲑气单胞菌的渔场。这样的渔场每年还应检测两次,不过每次采集的样本数可减少到30条鱼。 临床诊断采样;如果有皮肤病变,则从皮肤病变处取样,同时从肾,脾、肝等脏器中采样。 方法r先用解剖针刺穿头骨,破坏小脑,使鱼失去运动能力。对于皮肤病变部位,用灭菌解剖刀切开疖疮的患部(或溃疡部),无菌采集病变组织。接种TSA培养基,同时作一张涂片用于革兰氏染色,另取少许样品作细菌的运动性检查;对于内脏的采样,则用点燃的酒精棉球擦净.消毒被检鱼体表,在肛门前面0.5 cm处用无菌剪刀剪开腹部,然后从此处沿一侧向背部逐步转向头部剪成弧形切口,打开腹腔,无菌采集脏器。