SN/T 0850—2000 进出口蜂蜜中脯氨酸的测定方法分光光度法

SN/T 0850—2000.Method for the determination of proline in honey for import and export—Spectrophotometry. 1范围 SN/T 0850规定了进出口蜂蜜中脯氨酸含量的分光光度测定方法。本标准适用于进出口蜂蜜中脯氦酸含量的测定。 2测定方法 2.1方法提要 蜂蜜中的脯氨酸与茆三酮作用生成棕色络合物,用分光光度计在波长510 nm处测定其吸光度﹐用标准曲线法定量。 2.2试剂 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。 2.2.1甲酸。 2.2.2异丙醇溶液;量取50 mL异丙醇加水稀释至100 mL。 2.2.3茆三酮-乙二醇甲醚溶液;称取3 g茆三酮溶于100 mL的乙二醇甲醚中(乙二醇甲醚:又称溶纤剂,CH,OCH,CH,OH;Methyl cellosolve)。 2.2.4脯氨酸标准品;纯度≤99%。 2.2.5脯氨酸标准储备液;精确称取0.025 0 g脯氨酸标准品用水溶解并定容至100 mL。此溶液每毫升相当于250 ug 的脯氨酸。 2.2.6脯氨酸标准工作液:准确移取1 mI.脯氨酸标准储备液于10 mL容量瓶中,用水定容,此溶液每毫升相当于25 pg的脯氨酸。 2.3 仪器 分光光度计。 2.4.1︰标准曲线绘制:准确吸取脯氨酸标准溶液0.0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mL(相当于0，5,10,15,20,25 ug脯氨酸),分别移入具塞试管中,加水补充体积到1 mL,分别加入0.25 mL甲酸和1.0mL苟三酮-乙二醇甲醚溶液。盖紧瓶塞,在沸水浴中加热15 min,取出,移入70℃恒温水浴中继续发色10 min。加入 5 mL异丙醇溶液,放置5 min 后,在波长510 nm处以试剂空白调节零点,测定吸光度v绘制标准曲线。