SN/T 5364.2—2021 出口食品中致病菌检测方法微滴式数字PCR法第⒉部分:霍乱弧菌

SN/T 5364.2—2021. 1范围 SN/T 5364.2规定了食品中总霍乱弧菌和含毒力基因霍乱弧菌的微滴式数字PCR检测方法。本文件适用于食品中总霍乱弧菌和含毒力基因霍乱弧菌的快速定性检测。 SN/T 5364.2的检出限为1 CFU/25 g~5 CFU/25 g(或1CFU/25 mL~5 CFU/25 mL)。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 27403—2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测SN/T 1022进出口食品中霍乱弧菌检验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA( dcoxyribonuleic acid):脱氧核糖核酸。 ddPCR(droplet digital poly merase chain reaction):微滴式数字PCR。 gbpA(GlcNAc-binding protein gene);N-乙酰葡糖胺结合蛋白A的编码基因。PCR(poly merase chain reaction):;聚合酶链式反应。 tcp A( toxin coregulated pilin gene):毒力协同调节菌毛编冯基因。 5方法原理 分别针对霍乱弧菌种属特异性gbpA基因及毒力基因tc pA设计引物/探针,将一定浓度的引物、探针与模板 DNA及数字PCR反应预混液混合﹐配成双重数字PCR反应体系。将该双重数字PCR 体