SN/T 2055-2016 豇豆重花叶病毒检疫鉴定方法

SN/T 2055-2016.Detection and identification of Cowpea severe mosaic virus. 1范围 SN/T 2055规定了植物检疫中豇豆重花叶病毒检疫鉴定方法。 SN/T 2055适用于豆科繁殖材料(种子、植株)中豇豆重花叶病毒的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3基本信息 学名:Cowpea severe mosaic virus 缩写:CPSMV 分类地位:伴生豇豆病毒科(Secoviridae),豇豆花叶病毒亚科(Comovirinae),豇豆花叶病毒属(Comovirus)。 该病毒的其他信息参见附录A。 4方法原理 根据豇豆重花叶病毒与抗体之间的特异性反应,对植物样品进行ELISA检测:根据该病毒核酸的序列进行PCR特异性检测,通过电泳条带大小进行结果判定;根据该病毒核酸序列设计特异性引物和荧光探针,通过检测的荧光信号进行结果判定。 5仪器设备及试剂 5.1仪器设备 酶标仪、天平(感量,1/10000 g)、pH计、微量榨汁机、PCR仪、实时荧光PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、隔离温室、恒温水浴、低温冰箱等。 微量移液器(2 μL,10 μL,20 μL,100μL,200μL,1000 μL)酶联板、研钵、离心管花盆、消毒土等。 5.2 试剂 酶联免疫吸附测定试剂见附录B的B.1、RT-PCR检测试剂见附录C的C.1.实时荧光RT-PCR检测试剂见附录D的D.1。 试验用水应符合GB/T 6682要求。