SN/T 4675.12-2016 出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法

SN/T 4675.12-2016.Determination of lysozyme in wine for export-HPLC method. 1范围 SN/T 4675.12规定了葡萄酒中溶菌酶含量的高效液相色谱测定方法。 SN/T 4675.12适用于白葡萄酒和起泡葡萄酒中溶菌酶含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 本方法只检测葡萄酒中具有酶活性的溶菌酶的含量,但与蛋白质中酶真实的活性无关。葡萄酒中的溶菌酶经反相苯基柱分离后,用高效液相色谱荧光检测器或紫外检测器测定,保留时间定性,外标法定量。 4试剂和材料 4.5三氟乙酸(TFA)。 4.65% 盐酸溶液:量取5 mL盐酸,用水定容至100 mL。 4.7酒石 酸溶液:称取1.0 g酒石酸(4.4),用100 mL无水乙醇溶解,用水定容至1 000 mL。 4.8 溶菌酶标准物质(CAS:12650-88-3)。 4.9溶菌酶标准储备液:准确称取适量的溶菌酶标准品(4.8),加适量酒石酸溶液(4.7)超声震荡使其充分溶解并定容至刻度,配制成浓度为2 μL的标准储备液,保存在0 °C~4 °C的冰箱中。 4.10 溶菌酶标准工作溶液:分别准确量取溶菌酶标准储备溶液(4.9),用样品提取液稀释,配制成5.0 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L、25.0 mg/L、40.0 mg/L、50.0 mg/L、60.0 mg/L的标准工作溶液,现配现用。