SN/T 4643-2016 线虫标本采集分离保存规范

SN/T 4643-2016.Standards for sampling，detecting and preserving specimen of nematodes. 1范围 SN/T 4643规定了出人境植物检疫中线虫标本的采集、制作和保存方法。 SN/T 4643适用于出人境检验检疫部门对线虫标本的采集、制作和保存工作。 2方法原理 根据植物病原线虫不同的寄生方式,采集表现瘿瘤、叶斑、坏死变色、畸形等症状的样品,或采集寄主植物的根及根围土壤或介质,用改良漏斗分离法等分离线虫,然后浸泡保存或制作成永久玻片,达到对线虫标本保存的目的。 3仪器、试剂和用具 3.1 仪器 体视显微镜(10×以上,具透射光源)、恒温培养箱、移液器(20μL~200μL)、离心机(2000r/min以上)、冷藏箱、天平、Fenwick漂浮器等。 3.2试剂 福尔马林(4%甲醛)、甘油、乙醇、蔗糖、封片剂(中性树胶、阿拉伯树胶、指甲油)、石蜡、溶液I (96%乙醇/甘油/蒸馏水体积比20: 1: 79)溶液I<甘油/96%乙醇体积比1 : 19).乙二胺四乙酸二钠、二甲基亚砜、氯化钠、氢氧化钠。 DESS溶液配制方法参见附录A。 3..3 用具 钟面皿或培养皿、细胞培养皿、盖玻片、载玻片、剪刀、线虫挑针、酒精灯、双层纸巾、线虫滤纸、纱布、500 μL微量离心管、密闭塑料盒、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、加热板、筛网(10目、60目、300目、400目、500目)、取样铲、塑料袋、水桶、记号笔等。