SN/T 3277-2012 鳄梨日斑类病毒检疫鉴定方法

SN/T 3277-2012.Detection and identification of avocado sunblotch viroid. 1范围 SN/T 3277规定了进境植物检疫中对鳄梨日斑类病毒的RT-PCR、往返聚丙烯酰胺凝胶电泳和生物学测定三种检疫鉴定方法。 SN/T 3277适用于进出境鳄梨种苗中鳄梨日斑类病毒的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T 2122进出境植物及植物产品检疫抽样规则 3原理 鳄梨日斑类病毒(avocado sunblotch viroid,ASBVd)属于鳄梨日斑类病毒科( Avsunviroidae)鳄梨日斑类病毒属(Arusunviroid)。该类病毒的分子生物学和生物学特性(参见附录A)是检疫鉴定的主要依据。 4仪器设备及设施、用具及试剂 4.1 仪器设备及设施 天平(感量,1/10 000 g)、pH计、PCR仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、隔离检疫温室恒温水浴、 低温冰箱等。 微量移液器(2μL,10μL,20μL.100μL,200μL,1000μL)、研钵、离心管、花盆、消毒土等。 4.2 RT-PCR 检测试剂 见附录B。 4.3往返聚丙烯酰胺凝胶电泳检测试剂 见附录C。