SN/T 3752-2013 苹果星裂壳孢果腐病菌检疫鉴定方法

SN/T 3752-2013.Detection and identification of Phacidiopycnis washingtonensis Xiao & J.D Rogers. 1范围 SN/T 3752规定了植物检疫中苹果星裂壳孢果腐病菌的检疫鉴定方法。 SN/T 3752适用于进境苹果和梨植株及其果实中苹果星裂壳孢果腐病菌的检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T2455进出境水果检验检疫规程 3检疫鉴定原理 苹果星裂壳孢果腐病菌在寄主上的症状病菌形态学特征与培养性状及分子生物学特征是制定本标准的主要依据。该病菌的分类地位、寄主范围、分布和为害症状等背景资料参见附录A. 4仪器及用具 4.1 仪器 体视显微镜、生物显微镜、超净工作台，高压灭菌器、生物培养箱、台式高速离心机、PCR扩增仪、凝胶成像仪、电子天平(感量0.01g)、水浴箱、pH计。 4.2 用具 样品袋、标签、放大镜、镊子、解剖力酒精灯、接种针、培养皿(直径9 cm)、烧杯、三角瓶、试管、量筒、载玻片、盖玻片、研钵及研杵、微量移液器(可调式范围:2.5 L 1000 μL)、离心管。 5试剂和培养基 5.1 试剂 1% NaCIO溶液、无水乙醇、70%乙醇、无菌双蒸水、2% CTAB提取缓冲液、10%SDS溶液、3 mol/L醋酸钠溶液、PCR试剂(包括Taq聚合酶、dNTP、Buffer)、苯酚、三氯甲烷、异戊醇、Tris-HCl、EDTA、琼脂糖、DNA分子量标准、TBE电泳缓冲液。