SN/T 3746-2013 百合枯萎病菌检疫鉴定方法

SN/T 3746-2013.Detection and identification of Fusarium oxysporum f.sp.lilii. 1范围 SN/T 3746规定了百合枯萎病菌的检疫鉴定方法。 SN/T 3746适用于百合鳞球茎中携带的百合枯萎病菌的检疫鉴定。 2病菌基本信息 中文名:百合枯菱病菌 英文名:lily fusarium wilt . 学名:Fusarium oxysporum f.sp.lilii Snyd. & hans. 分类地位:无性阶段属于:真菌界(KingdomFungi),半知菌亚门(Deuteromycotina),丝孢纲(Hy-phomycetes) ,瘤座孢目( Tubercularigles),瘤座孢科(T uberculariaceae),镰刀菌属( Fusarium)。未见有性阶段。 3方法原理 本标准根据该病菌在百合鳞茎球上的主要危害症状特征、形态学特征以及PCR反应特性为鉴定百合枯萎病菌的依据。 4仪 器和用具 4.1 主要仪器与用具 超净工作台、生化培养箱、生物显微镜生物体视显微镜PCR仪、凝胶电泳仪、台式冷冻离心机、水浴培养箱、制冰机、旋涡振荡器、电泳仪、恒温水浴锅、紫外透射仪、凝胶成像系统、研钵和研棒、天平(感量0.0001g)、白磁盘和尖头镊子、pH计、塑料袋、离心管等。 4.2主要试剂和培养基 次氯酸钠、TrisHCI、氯化钠、EDTA.三氯甲烷、异戊醇、4种脱氧核苷三磷酸(dNTPs).溴化乙锭(EB)、RNase酶、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、异丙醇、巯基乙醇、溴酚蓝、CTAB、Taq酶等。PSA培养基(马铃薯200g,蔗糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL)。