SN/T 3686-2013 白蜡树黄化植原体检疫鉴定方法

SN/T 3686-2013.Detection and identification of Candidatus Phytoplasma fraxini. 1范围 SN/T 3686规定了白蜡树黄化植原体的检疫和鉴定方法。 SN/T 3686适用于进出境白蜡树苗木中白蜡树黄化植原体的检疫鉴定。 2原理 2.1分类地位 白蜡树黄化植原体( Candidatus Phytoplashna fraxini, Ash yellows ph ytoplasma),软壁菌门(Tenericutes) ,柔膜菌纲( Mollicutes),非固醇菌原体目(Acholeplasmatales)，非固醇菌原体科( Achole-plasmataceae) ,植原体属(Phytoplasma),16SrVI植原体组。 2.2 鉴定方法 白蜡树黄化植原体的分子生物学特性作为本标准鉴定方法的主要依据。 本标准应用植原体分类鉴定软件(iPhyClassifier)，得到特异性的植原体核糖体16SrDNA序列限制性内切酶模拟指纹图谱,该软件提供的模拟酶切图谱作为鉴定的依据。 3仪器、用具和试剂 3.1 仪器 PCR仪、超净工作台、高压灭菌锅制冰机、台式冷冻离心机、台式小型离心机、超低温冰箱、常规冰箱、旋涡振荡器、微量进样器、电泳仪、凝胶成像系统。 3.2 用具 可调移液器(20μL、200μL、1000μL)及相关吸头、研钵、离心管(2mL)、PCR管、量简、烧杯、酒精灯、镊子等。