SN/T 4097-2015 贝类派琴虫实时荧光PCR检测方法

SN/T 4097-2015.Real-time fluorescent PCR quarantine protocol for Perkinsus sp.in shellfish. 1范围 SN/T 4097规定了贝类中派琴虫的实时荧光PCR检测方法。 SN/T 4097适用于贝类组织中派琴虫的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1实时荧光PCR real-time fluorescent PCR 在普通聚合酶链反应的基础上加人一条特 异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和-一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告基团和淬灭基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成，实现荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步,达到实时定量的目的。 3.2Ct值cycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数，也可称为Cp值。