SN/T 3567.8-2017 交叉引物恒温扩增检测方法第8部分:疟原虫

SN/T 3567.8-2017.Detection method of crossing priming isothermal amplification-Part 8 :Plasmodium. 1范围 SN/T 3567.8规定了在国境口岸利用交叉引物恒温扩增法检测疟原虫的检测对象、检测程序及检测结果报告。 SN/T 3567.8适用于在国境口岸对疟原虫的快速筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 SN/T 3562国境口 岸疟原虫PCR检测方法 人间传染的病原微生物名录(卫生部2006) 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1交叉引物恒温扩增技术crossing priming isothermal amplification;CPA 一种核酸恒温扩增技术,CPA恒温扩增体系中除包含具有链置换功能的DNA聚合酶(DNAPoly-merase)外,还主要包括交叉引物、剥离引物和检测引物。这些寡聚核苷酸链能依靠该DNA聚合酶的高活性的链置换特性,使脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid,DNA)的循环扩增能不断的实现。 3.2交叉引物crossing primer 用于交叉扩增的主要引物，其中正向引物的5’末端序列与反向引物的杂交序列相同,而反向引物的5'末端序列与正向引物的杂交序列相同,因此在扩增过程中这两条引物互相引入对方的杂交序列，增加引物的杂交位点,促进扩增反应。 3.3剥离引物bumper primer 位于交叉扩增引物后方的短链引物,其作用是在链置换DNA聚合酶的作用下,将扩增引物的延伸链从模板上剥离。