SN/T 3457-2012 植物病毒分子生物学检测规范

SN/T 3457-2012.Criterion on detection of plant virus by molecular biology. 1范围 SN/T 3457规定了进出境植物检疫工作中植物病毒.类病毒的分子生物学检测方法与要求。 SN/T 3457适用于进出境植物及植物产品中植物病毒、类病毒的分子生物学检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN/T 1193基因检验实验室技术要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1聚合酶链式反应polymerase chain-reaction;PCR 简称PCR技术。模板DNA先经高温变性为单链,两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火,在DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸(dNTP)为底物,使退火引物得以延伸,然后不断重复变性、退火和延伸这一循环，使位于两段已知序列之间的DNA片段呈几何倍数扩增。 3.2反转录-聚合酶链式反应reverse transcription /polymerase chaip reaction; RT-PCR 简称RT-PCR,以提取组织或其他材料中的RNA为模板,采用Oligo(dT)、随机引物或特异性引物,在反转录酶和适宜的反应条件下,RNA被反转录成QDNA,然后再以cDNA作为模板,进行PCR扩增。