SN/T 1135.8-2009 马铃薯坏疽病菌检疫鉴定方法

SN/T 1135.8-2009.Quarantine identification of Phoma exigua var. foveata. 1范围 SN/T 1135.8规定了马铃薯坏疽病菌的检疫鉴定方法。 SN/T 1135.8适用于所有进境马铃薯薯块携带的马铃礱坏疽病菌的检疫鉴定。 2原理 2.1分类地位 马铃薯坏疽病菌(Phoma exigua var. foveala)的分类为真菌界Fungi, 无性型真菌Anamor phic fungi ,孔穴茎点霉。 2.2寄主 主要寄主为马铃薯。在安第斯山地区还危害昆诺藜(Chenopodium quinoa )和野生马铃薯。 2.3鉴定原理 该病原菌的危害症状.分离培养特性以及形态特征是检疫鉴定的主要依据。 3仪器设备、用具及试剂 3.1 仪器设备及用具 电子天平(感盘1/10 000 g)、解剖镜、显微镜、超净工作台、温控培养箱、高压灭菌锅、低温冰箱、普通冰箱镊子、量筒、培养皿等。 3.2试剂 无水乙醇、次氛酸钠、氨水、麦芽糖琼脂培养基(参见附录A)等。 4检验方法 4.1 症状观察 观察马铃薯薯块是否有病斑及菌丝线.分生孢子器等。 4.2分离培养 取有马铃礱坏疽病可疑症状的薯块,切开并在其病健交界处取样,切成4mm×4mm小块,0.5%的次氯酸钠表面消毒5 min,无菌水冲洗三遍,置于2%(质量浓度)麦芽琼脂培养基(MA)平板上,每皿放置5块~6块;或在无菌状态下直接挑取菌丝置于2%麦芽琼脂培养基上,20℃~22℃黑暗条件下培养。