SN/T 4820-2017 牛瓜氨酸血症PCR-DHPLC检测方法

SN/T 4820-2017.Detection method for bovine citrullinemia by PCR-DHPLC. 1范围 SN/T 4820规定了牛瓜氨酸血症PCR-DHPLC的检测方法。 SN/T 4820适用了快速筛查牛群中隐性的牛瓜氨酸血症(参见附录A)基因携带者。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用 文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CN牛瓜氨酸血症(Citrullinemia PCR聚 合酶链式反应( Polymerase chain reaction) DHPLC变性高效液相色谱( Denaturing high- performance liquid chromatography) PBS磷 酸盐缓冲液( Phosphate bufifer solution) TEAA三 乙基铵醋酸盐(Triethylamine acetate SNP单核 苷酸多态性(Single nucleotidepolymorphism) 4原理 变性高效液相色谱(DHPLC)是利用目标核酸片段PCR扩增产物,部分加热变性后,含有突变碱基的DNA序列由于错配碱基与正常碱基不能配对而形成异源双链。因包含错配碱基的杂合异源双链区比完全配对的同源配对区和固定相的亲和力弱。更易被从分离桂上洗脱下来，从而达到分离的目的。 SNP的有无最终表现为色谱峰的峰形或数目差异,依据此原理可很容易从色谱图中判断出突变的碱基片段。