SN/T 1917─2007 牛地方流行性白血病聚合酶链反应操作规程

SN/T 1917─2007. 1范围 SN/T 1917规定了牛地方流行性白血病聚合酶链反应检测方法。本标准适用于牛地方流行性白血病的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T6682`分析实验室用水规格和试验方法(eqv 1SO 3696:1987) SN/T1193基因检验实验室技术要求 3缩略语 下列缩略语适用于本标准。 3.1 BLV Bovine Leukemia Virus牛白血病病毒 3.2 PCR Polymerase chain reaction聚合酶链反应。 3.3 BSA bovine serum albumin牛血清白蛋白。 3.4 dNTPdeoxyribonucleoside triphosphate脱氧核糖核苷三磷酸 3.5 dATPdeoxyadenosine triphosphate脱氧腺苷三磷酸。 5试剂和材料 5.1双蒸水应符合GB/T 6682中一级水规格。 5.2琼脂糖(电泳纯)。 5.3溴化乙锭(EB)。 5.4 Taq酶:5 U/ pL。一20℃保存,避免反复冻融或温度剧烈变化。 5.5 DNA分子量标准(DNA Marker) ;50 bp~500 bp,须在 320 bp~360 hp之间至少有一条带。 5.6 BLV阳性对照:可取BL.V持续感染的FL.K细胞提取DNA用于PCR反应阳性对照,或由指定单位提供。 5.7 PBS(pH7.2)溶液、红细胞裂解液,淋巴细胞分离液、TE缓冲液,dNTP,引物、10×PCR反应液、电泳缓冲液和10×加样缓冲液参见附录A。