SN/T 1679—2005 动物边虫病微量补体结合试验操作规程

SN/T 1679—2005. 1范围 SN/T 1679规定了动物边虫病微量补体结合试验的操作方法,步骤及结果判定。本标准适用于动物边虫病的血清学诊断。 2缩略语 下列缩略语适用于本标准。 2.1VBS 巴比妥缓冲液(配方见附录A)2.2CFT补体结合试验 3材料与试剂 3.1仪器与器材 水浴箱、离心机、冰箱、96孔“U"型板﹑微量可调移液器、12通道微量移液器、吸头等。 3.2试验材料 各种被检动物血清的火能温度和时间见表1。 3.3试剂 3.3.1 阿氏液(见附录B)、VBS。 3.3.2边虫病补体结合抗原、阳性血清﹑阴性血清﹑溶血素和补体。由指定单位供给。 3.3.3致敏的绵羊红细胞悬浮液。 3.3.3.1采血 从公绵羊颈静脉无菌采血。将绵羊全血与阿氏液按2∶3的比例混匀,4℃冰箱保存备用(根据需用量,调整采血量和阿氏液量)。供血羊1次采血量最多不超过200 mL,采血间隔不少于6周。 3.3.3.2红细胞洗涤 用VBS将红细胞离心洗涤三次,每次2 500 r/min,离心10 min。洗涤后立即配制3%绵羊红细胞悬液或保存于4℃～8℃冰箱备用。 3.3.3.3 制备3%绵羊红细胞悬浮液 取已离心洗涤的红细胞,如果细胞与液面间出现溶血则再离心洗涤,直至无色透明为止,吸弃上清液﹐用VBS稀释红细胞﹐使成为3%的红细胞悬浮液。 3.3.3.4致敏红细胞 将3%的红细胞悬液与等量适当稀释的溶血素混合,置室温15 min。混合时需注意:总是将溶血素