YY/T 0127. 7一2001 口腔材料生物学评价 第2单元:口腔材料生物试验方法牙髓牙本质应用试验

YY/T 0127. 7一2001.Biological evaluation of dental materials-Part 2:Biological evaluation test method of dental materials-Pulp and dentine usage test. 8试验步骤 8.1动物准备 . 选择足够的动物,以保证每个试验周期中至少有七颗牙齿含试验材料,四颗牙齿含阴性对照材料。如有必要每-试验周期还应有四个阳性对照窝洞。 8.2牙齿预备 8.2.1用合 适的麻醉剂对动物实行全身麻醉.去除牙国所有牙石及菌斑。用3%(V/V)过氧化氢清沽、消毒牙齿表面,然后用含碘或洗必泰的消毒剂消毒。 在水喷等下,用锋利钻针在牙齿颊侧或唇侧颈部制备所衢数量的V类润。洞底剩余牙本质厚度小于1mm,但不暴露牙髓、除充填试验材料要求不同的操作外.均应用水清洗窝洞并用脱脂棉擦干窝洞。 注，若动物有明品龈炎,则应在窝溺制备前几天去除牙石及软垢,甚至需重复潜齿直至想炎得到控制。 8.2.2按随机分配的原则,每 -试验周期至少用试验材料充填七个窝洞,阴性对照材料充填四个窝洞。如有必要每一-试验周期还应有四个阳性对照窝洞。对于以前有阳性对照数据库的试验室,不必再做阳性对照试验,除非有时需验证阳性反应。 注:在阴性对照氧化锌丁香酚水门汀上可用粘接技术充填复合树脂或充填玻璃离子水门汀(尤其是长期组)。 9术后观察 9.1在试验期中,定期观察每只动物的反应,如饮食改变或口腔组织的炎症或化脓。 9.2 切片制备 9.2.1在7d士2d、28d士3d及70d士5d,用过量麻醉剂处死足够数最的动物,以得到每个试验周期至少七颗含试验材料的牙齿。检查充填体、牙齿及其支持组织,记录任何异常现象。取下每一-包含牙齿及其周围软硬支持组织的组织块,用中性福尔马林缓冲液固定。如在处死时，切取组织块前如用血管内滥注法固定可获得更好的固定效果。 9.2.2固定后,用台适的脱钙剂脱钙[如10%(V/V)甲酸成pH7. 4的0.5 mol/L EDTA液]。石蜡包埋,连续切片。通过牙齿窝洞沿长轴进行切片,切片厚5 pm~10 pm.间隔取片,HE染色。必要时用合适的细曹染色方法(如Brown and Brenn)或其他检测微獬的染色方法对剩余切片染色。 10牙本质及牙髓评价 盲法检查{片(事先不知是试验切片或对照切片)。对每-连续切片,详细描述并记录牙本质牙髓及根周组织的全部组织学特点，包括任何可能由窝固制备所引起的组织学变化(包括:表层及深层牙髓组织中炎症细胞的数量及密度;切割的牙本质小管牙酷端的成牙本质细胞层的变化.如细胞数目的减少及移位入牙本质小管的细胞数量;牙髓充血及出血情况;修复性牙本质的有无及数量;窝铜壁的变色情况等)。牙髓的炎症反应表现较常见,可从连续切片中,通过窝洞等间距地选择至少5张切片。按下列分级方法对牙髓组织炎症没润进行分级。