YY/T 1465.7-2021 医疗器械免疫原性评价方法第7部分:流式液相多重蛋白定量技术

YY/T 1465.7-2021.Immunogenic evaluation method of medical devices-Part 7:Liquid phase multiplex protein quantification technique by flow cytometry. 1范園 YY/T1465的本部分规定了利用流式液相多重蛋自定量技术定量检测样本中多种可溶性蛋自的试验方法。 YY/T 1465.7适用于评价医疗器械/材料诱导机体产生的免疫应答。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注8期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 16886.2医疗器 械生物学评价第2 部分:动物榴利要求 GB/T 16886.12医疗器 械生物学评价第12部分:样品制备与參照样品 3流式液相多重蛋白定量技术 3.1 实验原理 流式液相多重蛋白定量技术。是基于荧光微球技术与“双抗体夹心”液相检测技术的结合.可以实现多种可溶性蛋自同时定量检测。微球分别标记有不同波长的荧光,每-种微球分别耦联对应目标抗原的捕获抗体,特异性捕获样品中或标准品中的目的蛋白.捕获微球。目的蛋白与加入的检测抗体形成双抗体夹心的“三明治“结构复合物，利用流式细胞仪对该复合物的荧光强度进行检测。同时,通过有潮源性的标准品绘制标准曲线,可实现同时对待测样本中多种可溶性蛋白的定量检测。 3.2实验 动物 3.21总则 所有的动物试验应在经国家认可机构批准并符合实验动物福利全部适用法规的实验室内进行,同时应符合GB/T 16886.2的要求。 3.22动物的种属和要 求 常用的实验动物为小鼠。本部分中推荐使用未进行过试验的健康的BALB/e小鼠,无特定病原体(SPF)级.6~8周龄。正式试验前要将动物至少饲养5d以适应实验室环境。实验动物宜标明种属品系来源.性别.体重和周齡。试验开始时,动物的体重差异宜控制在最小范围,每只动物的体重不能超过同性别动物平均体重范围的土20%。推荐每种性别至少采用3只小鼠.如选用其他种属动物,宜对其适宜性进行说明. 3.3样晶 制备 按照GB/T 16886.12 的原则进行试验样品制备。