YY/T 0251-1997 微量青霉素试验方法

YY/T 0251-1997.Test methods of penicillin. 1范围 YY/T 0251规定了用微生物法测定微量青霜素的试验方法。 YY/T 0251适用于成品、清场后环境、设备及空气中微量青霉素的测定。最小检出盘0.008u/mL. 2引用标准 . 下列标准所包含的条文.通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。中华人民共和国药典1995年版二部 3方法提要 利用抗生素的抗茵性质及在琼脂培养基内的扩散渗透作用，将被检物放入摊布商度敏感检定茵的培养基.上,产生抑茵圆，根据抑菌圆直径判断青霉素污染,再根据标准曲线或数学公式计算出污染青霹索的量。 4试剂和溶液 本试验所用试剂除特殊注明外均为分析纯,所用水均为蒸馏水。 4.1青霉 素标准品。 4.2乙酸 正戊酯。 4.3培养基I :中华人民共和国药典1995年版二部(或培养基I :美国药典XXI版)。 4.4营养琼脂培养基:中华人民共和国药典1995年版二部。 4.5 10 g/L磷酸盐缓冲液:pH=6.0 称取磷酸氢二钾2g与磷酸二氢钾8 g.加蒸馏水至1 000 mL,滤过,在115C灭菌30 min. 4.6 100 g/L磷酸盐缓冲液:pH=2.5 称取100g磷酸二氢钾,溶于800mL蒸馏水中,加0.2mL依盐酸,再加蒸馏水至1000ml.用磷酸溶液[c (H,PO,)-6 mol/L]调节pH值,使灭菌后pH为2.2~2.5,备用。 4.7 10 g/L磷酸盐缓冲液:pH=2.5 将磷酸盐缓冲液(4.6)稀释10倍。 4.8青霉索酶溶液 用鲜肉汤将浓的青霉素酶溶液稀释到1000u/mL.37C恒温培养5天,5C以下冰箱保存备用。 4.9磷酸溶 液:c( H,PO,)=6 mol/L 取85%磷酸12.3 mL加蒸馏水17.7 mL. 4.10检定 菌液