QB 2394一2007 食品添加剂乳酸链球菌素

QB 2394一2007.Food additive- Nisin. 5试验方法 除非另有说明，在分析中仪使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682中规定的水。 5.1 感官擋标 取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下，观察其色泽。 5.2鉴别 a胰凝乳蛋白酶对乳酸链球菌素具有专一性， 在乳酸链球菌素中加入a胰凝乳蛋白酶(根据酶活力而定)，乳酸链球菌素活性立即消失。同时，乳酸链球菌素热稳定性与其他蛋白相比具有特殊性，pH为2.0的乳酸链球菌素水悬液，121C、30min, 乳酸链球菌素仍不丧失活力。 5.3 效价 5.3.1试剂和溶液 a)乳酸链球菌素标准品(NisinA) ; b)盐酸溶液: 0.02mol/L; c)吐温20:水=1 : 1; d)培养基(S|)，配比如下，胰蛋白胨0.8%;酵母商0.5%;葡萄糖0.5%;氯化钠0.5%;磷酸氢_钠0.2%;琼脂1 6%。 5.3.2分析步骤 5.3.2. 1标准溶液的制备 准确称取乳酸链球菌素标准品，溶于0.02mol/L盐酸中，使最终浓度为2mg/mL,摇匀，用0.02mol/L盐酸稀释成300倍、600 信，即成高、低剂量标准溶液。 5.3.2.2样品溶液的配制 称取一定量的样品，用0.02mor/L盐酸溶解后，稀释成高、低剂量样品溶液，其乳酸链菌素含量，按估计单位高、低剂量与标准品溶液大致相当。 5.3.2.3菌 株悬浮液的制备 用接种环取环已培养好的检测菌 (黄色微球菌，NCIB8166)置于6mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，即成。加入培养基中的菌液量应该达到6.0X 106个/mL。 5.3.2.4平板的制备 将S1培养基冷却至约70C，加入2.0%吐温浴液(吐温20:水=1: 1)充分混匀，等冷却至50C，加入6mL菌株悬浮液，混匀后小心倒入已水平放置的平板上，等凝固后，放置洁净工作台内约1h,置4C冰箱存放到次田使用，使用前用打孔器在平板上打出所需的孔数，小心弃去孔中的琼脂块。 5.3.2.5滴加溶液 用取样器向琼脂孔中滴加等量的高、低剂量标准溶液和样品溶液。 5.3.2.6恒温培养.